(1)鼓膜：松弛部或全鼓膜內陷，表現為光錐縮短、變形或消失，錘骨柄向后、上移位，捶骨短突明顯外突、前后皺襞夾角變小。鼓室積液時鼓膜失去正常光澤，呈單黃、橙紅油亮或琥珀色，光錐變形或移位。慢性者可呈灰蘭或乳白色，鼓膜緊張部有擴張的微血管，短突顯比堊色，捶骨柄呈浮雕狀。若液體為漿液性，且未充滿鼓室，可透過鼓膜見到液平面。此液面狀如弧形發絲，稱為發狀線，凹面向上，頭位變動時，其與地面平行的關系不變。透過鼓膜有時尚可見到氣泡，咽鼓管吹張后氣泡可增多。鼓氣耳鏡檢查鼓膜活動受限。
(2)拔瓶塞聲：分別緊壓耳屏后速放，雙耳分別試驗，患者自覺患耳有類似拔瓶塞時的聲響。
(3)聽力檢查：音叉試驗及純音樂聽閥測試結果顯示傳導性聾。聽力損失正負不一，重者可達40dB HL左右。因積液量常有變化，故聽閾可有一定波動。聽力損失一般以低頻為主，但由于中耳船生結構及兩春的阻抗變化，高頻氣導及骨導聽力亦能客觀下降，積液排出后聽力即改善。聲導肯圖對診斷有重要價值，平坦型(B型)為分泌性中耳炎的典型曲線;高負力型(C3型)示鼓咽管功能不良，部分有鼓室積液。聽力障礙顯著者，應行聽性腦干反應和耳聲發射檢查，以確定是否對內耳產生影響。
(4)CT掃描可見中耳系統氣腔有不同程度密度增高。
(5)分泌性中耳炎可發展為粘連性中耳炎或并發鼓室硬化癥。
